显微测微尺是在一块载玻片的中央，用树胶封固一圆形的测微尺，长1~2mm，分成100或200格。每格实际长度为0.01mm(10μm)。当用目镜测微尺来测量细胞的大小时，必须先用测微尺核实目镜测微尺每一格所代表的实际长度。
一、显微测微尺的使用
1.将一侧目镜从镜筒中拔出，旋开目镜下面的部分，将目镜侧微尺刻度向下装在目镜的焦平面上，重新把旋下的部分装回目镜，然后把目镜插回镜筒中;
2.将镜台侧微尺刻度向上放在镜台上夹好，使侧微尺分度位于视野中央。调焦至能看清镜台侧微尺的分度;
3.小心移动镜台侧微尺和转动目镜侧微尺，使两尺左边的一直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重合的直线;
4.纪录两条重合线间目镜侧微尺和镜台侧微尺的格数。计算目镜侧微尺每格所代表的实际长度。目镜尺每格所代表的实际长度=(两重合线间测微尺的格数/两重合线间目镜测微尺的格数)×10um;
5.取下镜台侧微尺，换上需要测量的玻片标本，用目镜侧微尺测量标本。
二、小常识
微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和测微尺，是专门用来校正目镜测微尺的;更为精确的是把0.1mm等分50格，每格0.002mm。校正时，将测微尺放在载物台上。
目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10mm长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
由于测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
